相信經常在實驗室做色譜分析的人都會有這樣的經驗:在絕大多數情況下,如果建立一個新的色譜方法(例如擴項),色譜圖往往不會“一帆風順",總會出現一些奇奇怪怪的狀況——要么沒有保留,要么分離度不夠,要么峰形難看,要么響應很差等等。
對于這種問題,我們要像老中醫一樣,望聞問切,對癥下藥。但要做到這一點,就需要了解現象背后的成因。今天,作者結合自己的經驗,來分享一下前延峰的成因。因為這種現象可以說是“一果多因",不找出對應的成因,往往難以解決。
前延峰的特點是峰的前沿平緩,后沿陡峭,看起來像被向前“拉扯",有時也會在前面出現“小包"。



2. 溶劑效應
溶劑洗脫強度過強,也是導致前延峰的重要原因。
例如初始流動相水相比例較高,而定容液為純甲醇或乙腈時,在進樣過程中,由于樣品溶劑洗脫能力更強,樣品液滴前端的分子會被優先洗脫,幾乎不被保留,因而“跑得更快"。
當強溶劑被流動相稀釋后,保留能力恢復正常,后續分子才被正常保留,從而形成前延峰。
這種情況通常表現為:主峰前出現一個隆起的“小包",且前延程度與定容液和初始流動相之間的極性差異有關。
降低溶劑效應的常見方法包括:
· 減少進樣體積
· 降低強溶劑在流動相中的比例
· 使用溶劑效應消除器
3. 色譜柱問題
當色譜柱發生填料塌陷,或“先天性"填充不均勻時,會導致固定相表面的活性位點分布不均(某些部位對樣品吸附能力變弱),從而產生非線性吸附。
當進樣濃度較高時,這些位點容易達到吸附飽和。此時,目標物在該吸附位置會分為兩部分:被吸附部分和飽和部分。顯然,飽和部分會“走得更快"。
如果被吸附部分的濃度(或摩爾數)大于飽和部分,則被吸附部分成為峰的主體,飽和部分形成峰前延;反之,如果被吸附部分濃度更低,則飽和部分成為峰的主體,這種情況會形成拖尾峰。針對這種情況,最直接的方法就是更換色譜柱。
